FDA对于血液相容性的额外要求-补体激活

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本文转载自 海河标测

补体激活试验简介

医疗器械/材料与血液接触后，可能激活血液中的补体系统，产生效应分子导致机体的严重急、慢性反应，同时影响医疗器械/材料的血液相容性。

No.1 哪类医疗器械需要进行补体检测？

由于补体系统分布在我们的血液系统中，补体激活依赖于表面接触。只有与血液发生直接接触的医疗器械需要进行补体激活测试。

No.2 补体与SC5b-9的关系？

补体存在于人和脊椎动物血清及组织液中，可介导免疫应答和炎症反应。在人体内，补体激活有三条不同的激活途径，下图可以看出，补体激活的三条途径具有共同的末端通路，即形成膜攻击复合物MAC（C5b-9）。补体激活的末端产物C5b-9与血清中的S蛋白形成一种亲水性的、无裂解细胞活性的大分子片段或无溶解细胞膜活性的大分子片段SC5b-9。通过检测SC5b-9分子的含量，可以反映出血清中补体系统的激活情况。

No.3 补体激活试验对照

▪ 阴性对照：推荐使用低密度聚乙烯；

▪ 阳性生物材料对照：采用天然乳胶手套，乳胶是一种高度激活补体的材料；

▪ 眼镜蛇毒因子阳性对照：是一种补体系统强激活物质，用于确定补体激活的最大作用；

▪ 标准人血清：用于激活补体的基线对照；

▪ LMCD对照：经过批准，或许可的，长期建立的，被认为是安全的医疗器械，与试验样品具有相似的设计，材料和临床使用并且在试验样品体外或体内安全评价作为参照样品。

No.4 医疗器械的补体激活的检测方法

常用的是使用酶联免疫的方法进行补体激活的检测。

将人血清加入预包被抗体的微孔板中，然后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的SC5b-9的抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后TMB进行显色，最终在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅与血清中的SC5b-9的浓度成正比。用酶标450nm 测定OD值，通过标准曲线计算SC5b-9的浓度。

No.5 补体激活的结果判定

补体激活试验不同于其他实验，没有明确的接受准则。补体激活试验需要借助于LMCD组或者阴性组来辅助判定检测结果。采用统计学分析进行结果评价，利用T检验比较检测组和阴性对照组或者LMCD组是否具有显著性差异，根据统计分析结果来辅助判断检测样品的结果是否被接受。