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聊聊生物指示剂

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发表于 2020-7-2 13:50:15 | 显示全部楼层 |阅读模式
转载自“拾西”

生物指示剂(BI)产品的工作原理基本相同:
BI暴露于灭菌条件、其所含的孢子与培养基接触,并在特定于孢子种类的适当温度下培养。如果任何有活力的孢子留在暴露的BI中,这些生长的孢子将进入吸收营养状态,因为有了营养来源和理想的生长温度。利用培养基中的碳水化合物,营养细胞产生酸性代谢物,当其逐渐积累,引起培养基的ph值的下降。ph值的下降导致ph值指示器的变化,从而带来灭菌周期失败的视觉确认只需要一个存活的孢子就可以改变培养基的颜色然而,即使在灭菌严重失败的情况下,许多活细胞仍留在BI中,开始变色仍需要几个小时的孵育时间才能被检测到。

个阳性的BI中的生化过程可以参考下面的标准生长曲线图。最初,细胞增殖很快,但随着营养物质的耗尽,生长速度减慢到一定程度。当细胞变得不再活跃,进而进入了“静止期”(stationary phase)。由于酸性代谢产物的积累和有效营养素的消耗,环境因代谢物而变得有“毒”时,细胞开始死亡。

对于大多数细菌来说,最初的萌发和增殖是由于生长介质中的碳水化合物(糖)提供了能量来源,在有足够碳水化合物和蛋白质的环境中,微生物总是先代谢碳水化合物但不能忽略的是有些菌种还具有将蛋白质作为能量来源进行代谢的能力,而蛋白质代谢的非酸性产物可能会影响“变色”。
生物指示剂用于灭菌过程的开发和验证的重要参照依据,因此BI供应商应提供完善的数据及资料,如:分析证明、微生物量、耐受特性(D、Z值)、储存条件、保质期、使用和处置说明等。 当然,不同的灭菌/净化形式,会对“优质”BI提出“额外”期望。比如对于VHP净化形式,由于VHP穿透性差,限制了其作为表面净化的有效性。因此,期望VHP净化周期验证使用的BI是由一个“完美”的单层孢子组成(如下图右侧图片),这些孢子沉积在一个均匀、无缺陷、完全没有污染物质的表面上。 否则,孢子受到碎片、团块等的保护(如下图左侧图片),那么H2O2的渗透会受到阻碍,从而可能产生一个阳性的BI(上面也提到,BI只需要一个存活的孢子就可以呈阳性生长)。
当然,“完美”通常是不可能的…,这就是为什么需要通过单点多BI的布置方式,从概率上去评价净化效果。可参考:
验证VHP效果时我们到底需要多少(BI)?

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